一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
番红固绿(植物)染液 Servicebio G1031
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、番红染色:切片入番红染液中染色1-2h,自来水稍洗,洗去多余染料即可。
3、脱色:切片依次入50%、70%、80%梯度酒精中各3-8s。
4、固绿染色:切片入固绿染液中染色30-60s,无水乙醇三缸脱水。
5、透明封片:切片入干净的二甲苯透明5min,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
木质化的细胞壁呈红色,纤维素细胞壁呈绿色。
四、注意事项:
1、番红在水中易褪色,水洗应该快,将多余染液洗去即可,不能让番红褪色。
2、染色后的片子应该形态结构清晰,没有多余的固绿染液残留。
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